特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 瘰疬分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Mycobacterium scrofulaceum | 貨號 | YSP96957 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術的缺點: 成本高; 設計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit進口/分裝 人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒 英文名稱:Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISA Kit* 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱:Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit* 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒英文名稱:Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T* 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α mannosidase,α Manase ELISA Kit進口/原裝 LN (laminin) 層粘連蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg Anti-ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml C10orf88 英文名稱: 10號染色體開放閱讀框88抗體 0.2ml Anti-GM-CSFR alpha/CD116 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽Multi-class antibodies規(guī)格: 96T Anti-COX10 細胞色素c氧化酶10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh MAPKAPK5/PRAK p38調節(jié)/激活蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.2ml Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關半胱酸肽酶4 96T RMND5B 英文名稱: RMND5B蛋白抗體 0.2ml 500克 ER培養(yǎng)基10升Eriksson MediumBR ER培養(yǎng)基(含維生素)10升Eriksson Medium with vitaminsBR MS培養(yǎng)基250克MS Medium用于植物組織培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基(含維生素)10升MS Medium with vitaminsBR Nitsch培養(yǎng)基(含維生素)10升Nitsch Medium with vitaminsBR 瘰疬分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒卷曲螺旋域蛋白質85C抗體Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC 熒光素標記酸化Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1抗體IgG50 ug 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體Rb/P105 RB/FITC 熒光素標記兔抗、大、成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體IgG100µl 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體RCC1/FITC 熒光素標記染色體濃縮調控蛋白1抗體IgG10 ug 細胞表面趨化因子受體4抗體Rbms3 proin/FITC 熒光素標記Rbms3 proin抗體IgG10 ug CD19抗體Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC 熒光素標記酸化染色體濃縮調控蛋白1抗體IgG10 ug 環(huán)氧合酶2/內過氧化物合成酶2抗體Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標記細胞質內的糖基化蛋白抗體IgG10 ug 白細胞分化抗原CD2AP抗體Resistin/FITC 熒光素標記抵抗素抗體IgG10 ug CD3/CD3-ε 抗體RelB /FITC 熒光素標記核轉錄因子NFKB-RelB蛋白抗體IgG10 ug 軟骨糖蛋白39抗體Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 熒光素標記衰老標記蛋白30抗體IgG100 ul |