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TSZelisa試劑盒技術(shù)基礎(chǔ)知識(shí)講解

點(diǎn)擊次數(shù):1371 更新時(shí)間:2017-08-18
 

TSZelisa試劑盒酶免疫技術(shù)的分類
酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標(biāo)記免疫技術(shù)的一種。免疫技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的檢測方法,即應(yīng)用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原。它的特點(diǎn)是具有高度的特異性和敏感性。如將抗原或抗體用可以微量檢測的標(biāo)記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進(jìn)行標(biāo)記,則在與標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)后,可以不必測定抗原抗體復(fù)合物本身,而測定復(fù)合物中的標(biāo)記物,通過標(biāo)記物的放大作用,進(jìn)一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。這種標(biāo)記免疫技術(shù)一般分為兩類,一類用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原或抗體的定位;另一類用于液體標(biāo)本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術(shù)范疇,后者則稱為免疫測定。

酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相和異相兩種類型,實(shí)際上所有的標(biāo)記免疫測定均可分成這兩類。以標(biāo)記抗體檢測標(biāo)本中的抗原為例,按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進(jìn)行,其反應(yīng)式如下:
Ab*Ag代表結(jié)合的標(biāo)記物, Ab*為游離的標(biāo)記物。如在抗原反應(yīng)后,先把Ab*Ag與Ab* 分離;然后測定Ab*Ag或Ab*中的標(biāo)記物的量,從而推算出標(biāo)本中的抗原量,這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標(biāo)記物* 失去其特性,例如酶失去其活力,熒光物質(zhì)不顯熒光,則不需要進(jìn)行Ab*Ag 與Ab*的分離,可以直接測定游離的Ab* 量,從而推算出標(biāo)本中的Ag含量,這種方法稱為均相法。
在異相法中,抗原和抗體如在液體中反應(yīng),分離游離和結(jié)合的標(biāo)記物的方法有許多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定,在某些激素等定量測定中也有應(yīng)用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點(diǎn)是將抗原或抗體制成固相制劑,這樣在與標(biāo)本中抗體或抗原反應(yīng)后,只需經(jīng)過固相的洗滌,就可以達(dá)到抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)的分離,大大簡化了操作步驟。這種被稱為EL1SA 的檢測技術(shù)成為目前臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣的免疫測定方法。
二、ELISA試劑盒方法類型和操作步驟
TSZelisa試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:① 固相的抗原或抗體,② 酶標(biāo)記的抗原或抗體,③ 酶作用的底物,根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
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