PrimaCell™大鼠肝星狀細胞試劑盒實驗要點及說明;
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
心房肌細胞
心室肌細胞
心肌成纖維細胞
主動脈內(nèi)皮細胞
主動脈平滑肌細胞
心臟微血管內(nèi)皮細胞
大隱靜脈平滑肌細胞
冠狀動脈內(nèi)皮細胞
腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞
淋巴管內(nèi)皮細胞
淋巴管成纖維細胞
真皮淋巴管上皮細胞
外周血白細胞
中國人外周血T淋巴細胞
口腔粘膜上皮細胞
牙周膜上皮細胞
食管上皮細胞
食管平滑肌細胞
胃粘膜上皮細胞
小腸粘膜上皮細胞
小腸平滑肌細胞
結腸粘膜上皮細胞
結腸平滑肌細胞
直腸粘膜上皮細胞