以下實驗方案介紹了大鼠肌肉成纖維樣細胞；RM1培養(yǎng)細抱胞六存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具依細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制」存培養(yǎng)基,于2C至8°C下儲存,夏至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于用細系。
2凍存貼壁細抱胞,利用傳代時所月方法輕柔地使細胞從廷織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細抱所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍染法或普使用 Countess(⑤自動細計數(shù)儀測定總細態(tài)數(shù)和活細百分比。根據(jù)所需活細
4.以大約100-200X9的離心力將細胞暴液楽心5至10分鐘。在無條件下小心鑰持掉上清液,不要攪動細抱胞沉定。
注:心速度和時?取決于細種類
5.月預冷的凍存培養(yǎng)基重新暴浮細胞沉,將其調至該細抱適會的活細胞密度。凍細胞,使涅度每分鐘大約降低1C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存?zhèn)}中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
