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乙醛脫氫酶(ALDH)樣本的前處理

點擊次數(shù):804 更新時間:2021-07-07
 

乙醛脫氫酶(ALDH)樣本的前處理:

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

① 準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬細胞,加入1mL試劑一和10uL試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

② 將勻漿 600g,4℃離心5min。

③ 棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11100g,4℃離心10min。

④ 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的 NOX(此步可選做)。

⑤ 步驟④中的沉淀即為線粒體,加入200uL試劑二和2uL試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復(fù)30次),用于NOX活性測定。

血清(漿)樣品:直接檢測。

1,2,3,5-Tetra-O-Acetyl-β-L-
Ribofuranose
1-HeptanesulfonateSodium
(庚烷磺酸鈉)
1-HexanesulfonicAcidSodiumSalt
(己烷磺酸鈉)
1-OctanesulfonicacidSodiumsalt
(辛烷磺酸鈉)
2,3,5-Tri-O-Benzoyl-1-O-
Acetyl-D-Ribofuranose
2,4-D
(2,4-二氯苯氧乙酸)
2,6-Dichlorophenolindophenol,
(氯靛酚鈉)
2’-Deoxy-D-Glucose
(2-脫氧-D-葡萄糖)
2’-Deoxy-D-Ribose
(2-脫氧-D-核糖)
20XSSC溶液
(20XSSC溶液)
2-Thiobarbituricacid
(2-硫代巴比妥酸)
3#Bilesalt
(三號膽鹽)
3-AT
4-Chloro-1-Naphthol
(4-氯-1-萘酚)
4-Methylumbelliferone
(4-甲基傘形酮)
5-Bromo-2'-Deoxyuridine

 

 
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