大鼠ELISA試劑盒對(duì)目標(biāo)蛋白的類(lèi)似物檢測(cè),具有*的靈敏度和特異性。在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào),為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或膜,未使用完的試劑,要按照說(shuō)明書(shū)上記錄的方式保存。 大鼠ELISA試劑盒是基于雙位點(diǎn)的雙抗夾心ELISA方法定量檢測(cè)樣品中TNF-α(惡病質(zhì)素)的含量。TNF-α(惡病質(zhì)素)特異性的抗體已經(jīng)預(yù)包被在細(xì)胞培養(yǎng)板上。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的目標(biāo)蛋白與固定化的抗體結(jié)合,移除未結(jié)合的底物后,加入目標(biāo)蛋白特異性的生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)洗滌,向反應(yīng)孔中加入鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物。洗滌移除所有未結(jié)合的鏈霉親和素-HRP試劑,加入HRP底物溶液,產(chǎn)生有色產(chǎn)物,顏色的深淺與目標(biāo)蛋白的的含量成正比。
大鼠ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng):當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。洗滌過(guò)程很重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,盡量使用排槍加樣。每次測(cè)定的同時(shí)要做好標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,要請(qǐng)經(jīng)過(guò)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)要最后乘以稀釋倍數(shù)。在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),要用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。底物要避光保存。不能用其它的試劑替換試劑盒中的試劑。