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關于原代細胞的一些簡單介紹

點擊次數:691 更新時間:2021-04-21
 
  原代細胞來源于活體或是新近死亡的供體,通過機械或酶方法解離獲得,其方案根據來源物種(例如人,小鼠)和所涉及的組織類型而變化。原代培養(yǎng)的一般是從活體組織中獲取的細胞,細胞體系比較復雜,不穩(wěn)定,比如腫瘤組織的原代培養(yǎng)細胞會含有腫瘤細胞、淋巴細胞、血管內皮細胞等等。一般傳代的細胞指的是已經趨于穩(wěn)定的單一細胞系。原代培養(yǎng)一般培養(yǎng)到十代左右,傳代培養(yǎng)可以培養(yǎng)至50代,甚至個別細胞發(fā)生突變形成類似于癌細胞無線增值,原代培養(yǎng)具有兩個特點接觸抑制和貼壁生長。最直觀的理解,就是不能無限傳代下去。
  原代細胞自然生長有兩種方式,錨定依賴或非錨定依賴,這主要取決于它們在體內的組織來源:外周血(非錨定依賴)或固體組織器官(錨定依賴)。細胞一旦分離后,24-48h內需要進行貼壁或起始,開始培養(yǎng)。培養(yǎng)通常包含以下步驟:組織切割和切碎,酶解,反復洗滌,研磨和微濾分餾,最后重新懸浮和接種收集的細胞群。對于松散的、被纖維結締包圍的組織,機械均質化可能足以進行解離。
  由于與細胞分裂相關的染色體端??s短,原代細胞在體外的壽命有限。大約20到60次分裂后,端粒變得太短而無法承受另一個循環(huán),導致細胞分裂停止。這種現象被稱為Hayflick極限。
 
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