在酶聯(lián)免疫方法技術中，elisa試劑盒免費代測首先要確定的變異因素就是酶標記物的工作濃度。因為酶標記物濃度的很小的一個變化，便會導致整個試驗結果產(chǎn)生很大的波動。另外，由于濃度過高，會使非特異性反應增加，而濃度過低又會影響測定的敏感性。因此，在正式準備試驗前必須準確滴定其工作濃度，才能完善整個實驗。
1. 酶標記抗體的滴定方法是：將抗原（或抗體）物理吸附于固相載體上，然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標抗體（或抗Ig抗體）與吸附在載體上的抗原（或抗體）起反應，以酶與底物的顯色反應程度來確定酶標記抗體的效價，或稱工作濃度。
2. elisa試劑盒免費代測其步驟為：先將抗原（或抗體）用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為10μg/ml左右，于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.1ml，4℃一夜，次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標記抗體用1%BSA-PBS液依次稀釋成1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600（根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定），分別加入反應孔中，每個稀釋度二孔，每孔0.1ml，37℃孵育1小時后洗滌。然后加底物液，每孔0.1ml，37℃10～30分鐘。以2M H２SO4 0.05ml終止反應。
3. 結果判定主要是以ELISA比色儀（酶標儀）讀取各孔的OD值，并以OD為縱座標，結合物濃度為橫座標，繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為1.0左右，且曲線斜率時的酶標抗體稀釋度，elisa試劑盒免費代測即為該標記物的工作濃度。
